Серологично изследователски метод
Серологично метод е набор от реакции, които се основават на взаимодействието на антиген-антитяло (Ag-Ab) и насочени към откриване на серумните и други телесни течности на антитела срещу антигени на инфекциозни агенти или подходящи микробни антигени. Серологично метод се характеризира с висока чувствителност и специфичност. Повечето от реакциите на този метод е лесен за носене и сметка, достъпна за широк кръг от лаборатории, съвсем безопасно, икономично, които подлежат на стандартизация. Недостатъците на серологичен метод включват: 1) индиректен резултат, когато етиологията на болестта се преценява не се разпределят на патогена, и от отговора (имунен) организъм на патогена; 2) необходимостта от парентерално намеса в тялото на пациента; 3) най-късно на диагнозата, поради естествените динамиката на хуморален имунен отговор; 4) наличие на анамнестичен часа (в резултат на по-рано прехвърля заболяване или ваксинация) на текущата Am инфекция. При определяне на микробни антигени 3-ти и 4-ти недостатъци липсват, но трябва да бъдат приспособени за да отговарят на различни микробен обръщение антигени и се отнасят тези функции с възможност за заснемане на материала да учат.
Етапи на серологични методи:
1) да отдели материалите за научни изследвания. В повечето случаи, материалът е серум. Той се получава след образуването на кръвни съсиреци, кръв трябва да вземе в строго асептични условия съгласно стандартния метод,
2) избиране на серологичен тест за даден случай зависи от целта на изследването, предназначени заболявания, фаза на заболяването, изследвания материал, реакции на чувствителност разполага специфичен лаборатория. За откриване Ab, и Ag използване аглутинация (PA). Пасивни хемаглутинацията (РНА)), имунофлуоресценция (IFA). За инхибиране на хемаглутинация (HAI). валежи. флокулация. свързване на комплемента (RAC), и др.
3) определяне на серологичен реакцията
4) Проверете серологично реакцията да се определи наличието на серологични маркери инфекция.
Различни характерни серологични реакции на няколко общи характеристики:
1), тъй като всички серологични реакции са реакциите на взаимодействие на Am и Аг във всички случаи, за да се определи наличието на Al в тест субстрат изисква набор от известен стандарт или еритроцитите разтворим Аг наречен diagnosticums. От друга страна, за да се определи наличието на Ag в набор от имунната диагностични серуми
2) взаимодействие на Аг и Аг се извършва само в присъствието на електролит, който обикновено се използва изотоничен разтвор на натриев хлорид или буферен смес, рН на системата трябва да бъде около 7,
3) за да се образува комплекс Ag-Ab изисква инкубационен период при специални температурни условия (от 4 ° С до 37 ° С). образуване на специфичен имунен комплекс настъпва бързо; видими за невъоръжено око явлението (аглутинация, лизис и др ..) - бавно, в продължение на няколко часа или дори дни,
4) двете компоненти серологичен отговор (антитяло и антиген) трябва да присъстват в еквивалентно съотношение. Излишък на всеки от компонентите на образуването на сложни блокове на Ag-Al и допринася за фалшиви отрицателни резултати.
Отчитане на серологични тестове се извършват визуално, а понякога и с лупа. серологичен реакция същество сметка намалява до определянето на феномена на свързване на образуване на комплекс АЬ и Ag Ar-Am. Визуално образуване на комплекс Ar-Аг е придружено от два основни явления - аглутинация и утаяване. Разликите между тях се определят от особеностите на антигени и антитела, специфични към него. В същото време, сред микробни антигени присъстват и тези, които индуцират синтез nepretsipitiruyuschih, образуване на комплекс Ar-Аг в този случай не се придружава от феномен на аглутинация нито феномен на утаяване, и откриването на факта на образуване на комплекс Ar-Аг изисква етикетиране реакционни диагностичен компонент специални етикети или диагностичен трансфер антиген на друго състояние на агрегиране.
При оценката на реакцията използва три основни критерии: 1) присъствието и интензивност на реакциите (и други предимства). 2) диагностичен титър, 3) увеличаване на титъра на Al в болестта 4 пъти или повече. Наличието на реакцията се регулира чрез визуални явления или свързване имунохимичен маркер. За да се оцени интензивността серологично реакционната използват принцип 4 "+" (Таблица 7).
Системата за оценяване на серологични тестове на 4 "+" за аглутинация и утаяване реакции